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熒光濾光片的選擇分析

更新時(shí)間:2022-04-19

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  熒光濾光片的工作原理:分子在吸收帶吸收激發(fā)光譜,然后在發(fā)射帶發(fā)射長(zhǎng)波的輻射光譜,即形成了熒光光譜。
 
  在分析領(lǐng)域,熒光可用于對(duì)生物和化學(xué)活性進(jìn)行定性判別、定量分析和實(shí)時(shí)觀察。
 
  由于靈敏度高、特異性好、簡(jiǎn)便等特點(diǎn),熒光濾光片廣泛應(yīng)用于生物和分析等領(lǐng)域。
 
  熒光濾波片選取的原則是在成像端盡可能讓熒光/發(fā)射光透過(guò),同時(shí)*阻擋激發(fā)光,獲得高信噪比。
 
  尤其是對(duì)于多光子激發(fā)和全內(nèi)反射顯微鏡的應(yīng)用,微弱的噪聲也會(huì)對(duì)成像效果造成很大的干擾,因此對(duì)信噪比的要求更高。
 
  通常我們看濾光片的參數(shù)一般會(huì)看透射率光譜,但往往熒光相對(duì)于激發(fā)光的強(qiáng)度很弱,
 
  選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD值。OD值更能直觀地反映濾光片對(duì)光的阻擋特性。
 
  在選擇激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片時(shí),兩者的阻擋深度光譜交點(diǎn)(OD交點(diǎn))是重要的判斷標(biāo)準(zhǔn),
 
  一般要求寬場(chǎng)光源激發(fā)是交點(diǎn)OD值大于5,激光激發(fā)時(shí)大于OD6,以實(shí)現(xiàn)較好的熒光信噪比。
 
  通帶的高透過(guò)率提高成像亮度,截止帶的深截止度確保不必要的光都被阻擋在通帶外,保證了成像質(zhì)量的高信噪比和高對(duì)比度,在任何應(yīng)用中產(chǎn)生最大的亮度和對(duì)比度。

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